|
|
|
|
|
 |
مشاهده طرح تحقیقاتی |
 |
|
|
|
| شناسه طرح |
8906160130 |
| کد داخلی |
|
| كد سه حرفی دانشگاه یا سازمان مجری اصلی |
61 |
| نام دانشگاه یا سازمان مجری اصلی |
دانشگاه علوم پزشكي گلستان |
| نام گروه یا دانشكده یا بخش محل اجرای طرح |
مركز تحقيقات بيوشيمي و اختلالات متابوليك |
| عنوان انگلیسی |
The Effect of Metformin on the Apoptosis and Cell Cycle in T47D Cell Line of Breast Cancer |
| عنوان فارسی |
اثر متفورمين بر روند آپوپتوز و چرخه سلولي در رده سلول سرطاني پستان T47D |
| خلاصه طرح به فارسی |
آپوپتوز مرگ برنامه ريزي شده سلولي است كه از ويژگي هاي آن كوچك شدن سيتوپلاسم و تجمع هسته آن مي باشد . در اغلب سلول هاي سرطاني روند آپوپتوز بلوكه مي شود. يكي از عوامل مهمي كه سبب تداوم رشد و تكثير سلول هاي ناميرا مانند سلول هاي سرطاني مي شود، آنزيم تلومراز است. تلومراز در اغلب سلول هاي سوماتيك طبيعي انسان وجود ندارد، اما در بيشتر از 90 درصد سلول هاي سرطاني و سلول هاي فناناپذير دچار تنظيم افزايشي مي گردد. بررسي هاي اخير روي داروهايي متمركز شده اندكه بتوانند پديده آپوپتوز را در سلول هاي سرطاني القاء كنند. اين داروها ممكن است داروهاي شناخته شده قديمي با انديكاسيون متفاوت از درمان سرطان باشند. متفورمين يكي از اين داروها است كه در واقع براي پايين آوردن قند خون در بيماران ديابتي نوع دو استفاده مي شود. برخي مطالعات به نقش متفورمين در بروز پديده آپوپتوز اشاره مي كنند ولي اين مطالعات هنوز تمامي رده هاي سلولي و تمامي فاكتورهاي دخيل در بروز آپوپتوز را پوشش نمي دهند.
سرطان پستان، شايع ترين سرطان در زنان و اولين علت مرگ ناشي از سرطان در زنان 44-40 ساله است. اين بدخيمي، 33% سرطان هاي زنان را تشكيل داده و مسؤول 19% از مرگ هاي وابسته به سرطان مي باشد. بنابر اين مطالعات بر روي درمان اين نوع سرطان به كمك القاء آپوپتوز اهميت زيادي دارند. ما در اين مطالعه براي اولين بار در رده سلولي سرطان T47D اثر احتمالي متفورمين را روي القاي آپوپتوز و تغيير سطح آنزيم تلومراز بررسي خواهيم كرد. |
| واژههای کلیدی به فارسی |
متفورمين - آپوپتوز و چرخه سلولي- سلول سرطاني پستان T47D |
| تاریخ تصویب |
1389/8/5 |
| مدت زمان اجرا به ماه (مصوب) |
24 |
| ضرورت اجرای طرح |
نتايج كلي نشان مي دهد كه متفورمين در برخي رده هاي سلولي سرطاني آپوپتوز را القاء مي كند و در برخي ديگر بي تاثير مي باشد ولي هنوز گزارشي از اثرات متفورمين روي رده سلولي سرطان پستان T47D وجود ندارد. لذا با توجه به اهميت سرطان پستان و درصد شيوع بالاي آن در اين مطالعه بر آن شديم كه از اين رده سلولي استفاده كنيم. |
| اهداف اجرای طرح |
1- تعيين اثر متفورمين بر سطح بيان ژن آنزيم تلومراز در محيط كشت سلولي سرطاني پستان و سلول كنترل
2- تعيين اثر متفورمين بر سطح بيان ژن هاي Akt، PI3K،Caspase ، P53، PARP،P21، LKB1، P27، CYCLIN و E2F در محيط كشت سلولي سرطاني پستان و سلول كنترل
3- مقايسه اثر متفورمين بر سطح بيان ژن آنزيم تلومراز در محيط كشت سلولي سرطاني پستان و سلول كنترل
4- مقايسه اثر متفورمين بر سطح بيان ژن هاي Akt، PI3K،Caspase ، P53، PARP،P21، LKB1، P27، CYCLIN و E2F در محيط كشت سلولي سرطاني پستان و سلول كنترل |
| روش اجرای طرح |
1.هدف اختصاصي اول: تعيين اثر متفورمين بر سطح بيان ژن هاي Akt، PI3K،Caspase ، P53، PARP،P21، LKB1، P27، CYCLIN و E2F در محيط كشت سلولي سرطاني پستان و سلول كنترل
الف) خلاصه روش اجرا: براي تعيين اثر متفورمين در كشت سلولي سرطاني پستان (T-47D) و سالم در محيط Invitro نتايج بررسي مورد بررسي قرار مي گيرد. به همين منظور رده سلولي سرطاني پستان(T-47D) از انستيتو پاستور خريداري مي شود. سپس اين رده سلولي در محيط كشت Dulbeco,s modified Eagle,s همراه با سرم گاوي 10% در اتمسفر حاوي CO2 5% و در دماي 37 درجه سانتيگراد و04/7= pHدر انكوباتور CO2 دار(شرايط متعارفي در اين آزمايش)كشت داده مي شود، تا به حد نصاب سلول هاي مورد نياز (در هر پليت يك ميليون سلول بايد باشد) براي تيمار شدن برسند كه در هرگروه مورد و گروه كنترل مي بايست سه پليت يك ميليون سلولي باشد. بعد از اينكه تعداد مورد نظر حاصل شد، اين سلول ها را با دوزهاي مختلف متفورمين انكوبه مي كنيم. مشخص كردن دوز لازم براي تيمار كردن، براساس مطالعات مشابه در اين زمينه و Pilot Study(مطالعه آزمايشي) است كه بهترين دوز و زمان انتخاب مي شود. بعد از انتخاب دوز و زمان و تعيين گروه ها، سلول ها توسط اين تركيبات تيمار خواهند شد. قابل ذكر است گروه كنترل به گروهي گفته مي شود كه سلول هاي سرطاني T-47D در محيط كشت سلولي، بدون هيچ تيماري قرار مي گيرند. بعد از مدت معين و مشخص، سلولهاي چسبيده به فلاسك توسط تريپسين برداشت شده و پس از استخراج RNAي سلول ها و طراحي پرايمر آنها، بيان ژن هاي Akt، PI3K،Caspase ، P53، PARP،P21، LKB1، P27، CYCLIN و E2F با استفاده از روش Real Time-PCR اندازه گيري مي شود و در اينحال محصول آن بر روي ژل آگارز، الكترفورز مي گردد.
2.هدف اختصاصي دوم: تعيين اثر متفورمين بر سطح بيان ژن آنزيم تلومراز در محيط كشت سلولي سرطاني پستان و سلول كنترل
الف) خلاصه روش اجرا: براي تعيين اثر متفورمين بر سطح بيان ژن آنزيم تلومراز در محيط كشت سلولي سرطاني پستان و سلول كنترل مورد بررسي قرار مي گيرد.به همين منظور رده سلولي مورد نظر را در محيط Dulbeco,s modified Eagle,s همراه با سرم گاوي 10% در اتمسفر حاوي CO2 5% كشت مي داده و سپس آنرا با دوزهاي مختلف متفورمين انكوبه مي كنيم . بعد از مدت معين سلولهاي چسبيده به فلاسك برداشت شده و پس از استخراج پروتئين سلول ها و اندازه گيري پروتئين تام، فعاليت آنزيم تلومراز با استفاده از روش PCR-ELISA اندازه گيري مي شود . |
| اعتبار طرح |
86374000 |
| محل تأمین اعتبار |
دانشگاه علوم پزشكي گلستان |
| تاریخ عقد قرارداد |
1389/8/5 |
| در راستای اولویتهای دانشگاه |
بلي |
| ارجاع به كمیته اخلاق |
بلي |
| وضعیت كنونی طرح |
فعال و منتشر شده |
| مجری اصلی |
2162187159 |
| همکاران |
1000000377--0046844503--2181117993--1000000370--1000000488 |
| تاریخ بهروز رسانی |
1390/4/15 |
| ناظران طرح |
آقاي کامران حیدری |
| داوران طرح |
[hidden] |
| محل اجرای طرح |
مركز تحقيقات بيوشيمي و اختلالات متابوليك |
| نظرات کمیته اخلاق |
از نظر معيارهاي اخلاقي مورد تاييد است |
| دفعات مشاهده |
1135 بار |
|
برگشت به فهرست
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
